没有音乐一样跳舞

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教学实习第四周——Hill Reaction

Photosynthesis System ll——Ditto's Blog

这周是教学实习第四周,学生们要做光合作用的Hill Reaction(希尔反应*)。其实这个实验原理非常简单,但在我带的实验里恐怕是最繁琐的一个了。为了避免出现教学事故,上周周日的早晨8点半,我们就开始针对实验材料和步骤进行了讨论和修改,最后决定以菠菜叶片作为提取叶绿体的材料。我们做了整整一天的预实验,重复多次之后确定了适合学生们的实验步骤。中午我发短信订了四份快餐,拿到办公室里匆匆吃了几口,也顾不上午睡了。Hoho,做老师真的很辛苦,尤其是你需要对学生认真负责的时候。

实验课的时间是周二到周五,每天下午两点开始。周二下午的那次课,出了一些意外的小问题。比如低温高速离心时离心机出现99#Error,后来我检查出是转子型号错误;当天所使用的材料中叶绿体活性太高,对照组与实验组的2,6-D几乎都被消耗殆尽,结果不显著;有些同学竟然不知道什么是OD值,为什么要测吸光度,这个,他们应该在有机化学课程中学过嘛。

晚上在Lab里认真地把课上用的PowerPoint从头到尾审查了一下,把取样和加试剂的数值做了一些改动,然后仔细考虑了几点注意事项,一一列出来,在下次实验课之前写到白板上:

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            【注意事项】
1.提取叶绿体时:
全程操作在低温条件(冰浴)下进行;
离心管需相互配平后才能离心;
在两次离心时,第一次留上清液,第二次弃上清液;
将沉淀悬浮均匀(用移液器)后,放在冰浴中保存,待实验结束后方能弃掉! 
2.加样过程中:
试管一定要标号;
希尔反应时所加叶绿体悬浮液,应用提取液稀释,不能用丙酮;
3.照光时:
照光前同时去掉黑纸,照光结束后先用黑纸包好,待测定OD值时去掉。
切记不能将水溅到灯泡,以防灯泡爆炸!
4.比色:
分别以丙酮和缓冲液为参比;
注意两次比色时的波长不同(652nm & .600nm)。
ps:进入实验室后,先将研钵洗净、标号,置于冰箱冷冻室预冷。
    待离心前,将分光光度计打开预热。
    注意试验步骤上的改动。
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我用了20多分钟将实验原理步骤进行了讲述,由于专业课与实验课有点脱节,我把PSll(光系统Ⅱ*)上的电子传递链又仔细讲了一遍,最后又把容易出错的地方强调了两次。相比之下,今天的课比较顺利。等大家做到离心这一步的时候,时间上比昨天提前了20多分钟。不过这可能也与分组有关系——昨天上课的全是男生,今天则几乎全是小女生。经过数周课上的观察,我不得不承认女生的确比男生细致很多。当然这是一般规律,并不一定有普适性。大多数男生在实验的时候可谓相当豪爽,有两个男生估计是玩CS玩多了,将移液器抽满水后偷偷打水仗;还有个男生一边嚼着饼干一边向试管里加DCMu(一种除草剂),全然置生死于不顾。当然,他们随后都被我教育了。

虽然我和他们相差不过三、四岁,但他们这一年龄层的孩子,小时候受到的变态教育要比我们少的多。什么上课双手要背后了,什么听老师话了,什么不能这个不能那个的纪律守则了,他们还不至于像我们那样听得耳朵起茧。他们估计不会有两天内必须背下来整整一本《行为规范》,背不下就让家长领走的经历。新东方的老罗(罗永浩)讲课时海侃:”国内每个中小学校都想方设法找一个变态的中年妇女当教导主任,也不知道上哪里找来的那么多的变态的中年妇女,并且,还凑巧都当了教导主任!”

好在我不是变态,更不是中年妇女,也不打算当教导主任。女生们实验都异常认真,也频繁地向我提出各种各样的疑问。有个扎着歪向一侧的马尾鞭的小女生常跑过来问一些很可爱的问题:

“老——师,我可以用这个么?”——她手里拿着一根移液管。
“老——师,我们这个试管里的绿色好浅呀,为什么呢?”
“老——师,我们的西红柿苗都死掉了……呜呜”

我常常忍俊不禁,这个广东口音的小女生实在是太cute。当然我也有被问倒的时候,有一次做植物水势的实验时,有个学生问我一个很奇怪的问题,我一时回答不上来:”这个,这个……”那个学生见状立即对我说:”哦,老师,我自己会弄清楚的,谢谢老师!”说完就蹦走了!呵,给我留了个面子。

再回到今天的实验上来吧。虽然我仔细板书了详细的注意事项,但是还是有几个学生出错了。其中有一组同学把序号标在试管塞顶部,结果测定过程中搞不清楚手里的试管是6号还是9号了。

处理实验数据的时候,我逐个小组地给大家进行结果解释。然后给他们在原始记录上签字,以防伪造数据。签字后的同学去实验准备室观察我们上次课进行的矿质营养缺乏症的水培实验结果。在实验准备室,学生们仔细地记录着株高、叶色、pH值等等各项指标,当然提出了很多疑问,等最后一个同学离开,已经是接近傍晚7点了。我把他们今天交上来的上次实验的报告塞进包里——晚上还要批改。明天轮到下一个班做实验,希望他们不要出太多状况吧。

我的肚皮早就瘪了,ok,吃饭去。

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[注*1] Hill Reaction: In the 1930’s Robin Hill and his colleagues discovered that the process of oxygen evolution can be separated from the process of carbon fixation. They found that chloroplast fragments (thylakoids) isolated from leaves can evolve oxygen in the light if an oxidized compound capable of accepting electrons is provided. In the intact leaf, ferredoxin, NADP, and ultimately 3-phosphoglyceric acid (3-PGA) accept electrons from water, and in the process oxygen is released. This reaction is known as the Hill reaction.

[注*2] Photosystem II (PSII) is a multisubunit complex embedded in the thylakoid membrane of higher plants, algae and cyanobacteria. It contains a large number of cofactors including, chlorophyll, pheophytin, carotenoids, plastoquinone, non-heme iron and manganese, which together trap, transfer and modulate the utilization of solar energy, to drive the water splitting reaction.

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